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雌二醇-雞卵清白蛋白偶聯(lián)物在免疫分析檢測(cè)中有哪些應(yīng)用?

2024-09-11 [108]

雌二醇-雞卵清白蛋白偶聯(lián)物|Estradiol-Ovalbumin Conjugate(Estradiol-OVA Conjugate)

雌二醇 - 雞卵清白蛋白偶聯(lián)物在免疫分析檢測(cè)中有以下重要應(yīng)用:

 

一、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA

競(jìng)爭(zhēng)法 ELISA:將偶聯(lián)物包被在酶標(biāo)板上,加入待測(cè)樣品和一定量的抗雌二醇抗體。樣品中的雌二醇與偶聯(lián)物競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合抗體。經(jīng)過(guò)孵育和洗滌后,加入酶標(biāo)記的二抗,通過(guò)酶催化底物顯色。根據(jù)顯色強(qiáng)度與標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)比,可以確定樣品中雌二醇的含量。這種方法適用于檢測(cè)低濃度的雌二醇。

間接法 ELISA:先將偶聯(lián)物包被在酶標(biāo)板上,加入待測(cè)樣品,若樣品中含有雌二醇抗體,會(huì)與偶聯(lián)物結(jié)合。洗滌后加入酶標(biāo)記的抗抗體,再次孵育和洗滌后,加入底物顯色。顯色強(qiáng)度反映了樣品中雌二醇抗體的水平,間接推斷出雌二醇的存在情況。

 

二、免疫層析法

膠體金免疫層析:將抗雌二醇抗體標(biāo)記在膠體金顆粒上,偶聯(lián)物固定在硝酸纖維素膜的檢測(cè)線上。當(dāng)含有雌二醇的樣品滴加到試紙條上時(shí),樣品在毛細(xì)作用下向前移動(dòng)。如果樣品中存在雌二醇,會(huì)與膠體金標(biāo)記的抗體結(jié)合,形成復(fù)合物。該復(fù)合物繼續(xù)移動(dòng),與檢測(cè)線上的偶聯(lián)物競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合抗體。根據(jù)檢測(cè)線的顯色情況,可以快速判斷樣品中雌二醇的有無(wú)或含量范圍。

熒光免疫層析:采用熒光標(biāo)記的抗體和偶聯(lián)物進(jìn)行檢測(cè)。樣品中的雌二醇與熒光標(biāo)記的抗體結(jié)合后,在層析過(guò)程中與檢測(cè)線上的偶聯(lián)物相互作用。通過(guò)檢測(cè)熒光強(qiáng)度,可以定量分析樣品中雌二醇的含量。這種方法具有更高的靈敏度和準(zhǔn)確性。

 

三、化學(xué)發(fā)光免疫分析

以偶聯(lián)物作為標(biāo)準(zhǔn)品或校準(zhǔn)品:在化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)中,使用雌二醇 - 雞卵清白蛋白偶聯(lián)物制備標(biāo)準(zhǔn)曲線。將已知濃度的偶聯(lián)物與抗雌二醇抗體和發(fā)光標(biāo)記物反應(yīng),通過(guò)測(cè)量發(fā)光強(qiáng)度與偶聯(lián)物濃度的關(guān)系,建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。然后將待測(cè)樣品與抗體和發(fā)光標(biāo)記物反應(yīng),根據(jù)發(fā)光強(qiáng)度在標(biāo)準(zhǔn)曲線上確定雌二醇的含量。

 

四、免疫傳感器

基于抗體的免疫傳感器:將抗雌二醇抗體固定在傳感器表面,當(dāng)含有雌二醇的樣品流過(guò)傳感器時(shí),雌二醇與抗體結(jié)合。然后加入偶聯(lián)物作為競(jìng)爭(zhēng)試劑,與樣品中的雌二醇競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合抗體。通過(guò)測(cè)量傳感器的信號(hào)變化,可以定量檢測(cè)雌二醇的含量。這種免疫傳感器具有快速、靈敏、實(shí)時(shí)檢測(cè)的優(yōu)點(diǎn)。

基于適體的免疫傳感器:適體是一種具有高親和力和特異性的核酸或肽分子,可以替代抗體用于免疫傳感器。將適體固定在傳感器表面,與雌二醇結(jié)合后,加入偶聯(lián)物進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)。通過(guò)檢測(cè)傳感器的信號(hào)變化,可以實(shí)現(xiàn)對(duì)雌二醇的檢測(cè)。適體免疫傳感器具有穩(wěn)定性好、易于合成和修飾等優(yōu)點(diǎn)。

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