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介紹一下 FITC-苯硼酸的作用原理

2024-11-07 [74]

Fitc-苯硼酸|FITC-PBA|FITC-Phenylboronic acid

FITC - 苯硼酸的作用原理主要基于其兩個(gè)關(guān)鍵組成部分的特性及它們之間的相互作用,具體如下:

 

1.苯硼酸的識別作用:

特異性結(jié)合糖基:苯硼酸是一種全合成的多羥基化合物的識別體,能夠與含有順式二醇結(jié)構(gòu)的糖分子發(fā)生特異性結(jié)合。在生理?xiàng)l件下,苯硼酸中的硼原子處于缺電子狀態(tài),而糖分子中的順式二醇結(jié)構(gòu)可以與硼原子形成可逆的硼酸酯鍵。這種結(jié)合具有較高的特異性,能夠選擇性地識別含有糖基的化合物,如糖蛋白、糖脂等生物分子中的糖部分。

結(jié)合的可逆性:苯硼酸與糖基的結(jié)合是可逆的,這一特性使得 FITC - 苯硼酸在與糖基結(jié)合后,在一定條件下(如改變 pH 值、加入競爭物等)又可以解離。這種可逆性對于一些需要動態(tài)監(jiān)測或可調(diào)控的實(shí)驗(yàn)非常重要,例如在研究細(xì)胞表面糖基化的動態(tài)變化過程中,可以通過控制條件來觀察 FITC - 苯硼酸與糖基的結(jié)合和解離情況。

2.FITC 的熒光標(biāo)記作用:

熒光特性:FITC 是一種常用的熒光染料,具有優(yōu)異的光學(xué)性能。其激發(fā)波長在紫外光區(qū)域,發(fā)射波長在可見光區(qū)域,當(dāng)用特定波長的紫外光照射 FITC 時(shí),FITC 分子會吸收光子能量從基態(tài)躍遷到激發(fā)態(tài),隨后從激發(fā)態(tài)回到基態(tài)時(shí)會釋放出波長較長的可見光,即產(chǎn)生熒光。

標(biāo)記與信號放大:FITC 通過與苯硼酸結(jié)合,形成 FITC - 苯硼酸復(fù)合物。當(dāng) FITC - 苯硼酸與含有糖基的生物分子結(jié)合后,FITC 的熒光信號就與糖基化的生物分子相關(guān)聯(lián)。這樣,通過檢測熒光信號就可以間接反映出生物樣品中糖基化的情況,實(shí)現(xiàn)對糖基化生物分子的標(biāo)記和追蹤。由于 FITC 的熒光信號較強(qiáng),即使是少量的 FITC - 苯硼酸與糖基結(jié)合,也能夠產(chǎn)生明顯的熒光信號,從而實(shí)現(xiàn)對糖基化生物分子的高靈敏度檢測。

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